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上新品 | 多款高性能RT单酶,让RT-qPCR试剂开发事半功倍

发布时间:2023-08-28

一步法RT-qPCR因操作便捷、灵敏度高、特异性强等优势,在核酸检测领域得到广泛使用。逆转录(RT)酶,作为其关键组分,直接影响一步法核酸检测试剂的准确性和灵敏度。


在一步法反应中,基因特异性引物首先与待检测靶标匹配,并在逆转录酶的催化下合成******链cDNA。在这一过程中,错误的模板-引物匹配产生的非特异cDNA会在后续的PCR中被放大,从而出现非特异信号,导致结果误读。


为解决上述问题,诺唯赞借助自身BioSmart平台,针对一步法RT-qPCR/PCR场景开发了逆转录酶RW201及其可冻干版本RWL201,其DNA聚合酶结构域在低温下可自发收缩并在环境温度高于37℃下******,避免了低温下的引物-模板错误匹配和逆转,提高了检测特异性和灵敏度。


新品介绍


性能展示-RW201

优异的高低浓度均衡性

得益于温启动特性,Vazyme #RW201能够避免低温下(体系配置过程、PCR升温过程)非特异靶标的逆转录,减少dNTP、Mg2+等扩增原料的消耗,保证在低浓度模板情况下,仍能扩增特异性靶标,扩增平台期与高拷贝数模板一致。


图1.不同逆转录酶扩增线型情况



适配快速程序

Vazyme #RW201经过定向改造,能够以更快的速率合成cDNA,在PCR程序一致的情况下,2 min逆转录可达到和15 min逆转录同样的灵敏度。


图2.RW201在不同程序下的扩增情况


Vazyme #RWL201在完全保留了RW201性能同时,通过去除甘油,增加了冻干的可行性。


RWL201优异的稳定性

表1.RW201在冻融、温度存放下扩增情况

液氮冻融50次、4℃存放4 W、37℃存放30 d后,Vazyme #RWL201性能无显著变化。



性能展示-RL301

可抑制1 ng RNase A


图3.RL301耐受RNase A 情况

(RNA:1 μg;RI:40 U;20 μl反应体系)


在20 μl反应体系中,RL301能够抑制1 ng RNase A,RNA未发生明显降解。


更高的抗氧化活性




图4.RL301抗氧化情况

(RNA:1 μg;RI:40 U;RNase A:0.6 ng;20 μl反应体系)

RL301经过定向改造,提高了抗氧化能力,大大降低了对还原剂的依赖。


优异的存储稳定性与高温耐受性






图5:RL301稳定性情况

(RNA:1 μg;RI:40 U;RNase A:0.6 ng;20 μl反应体系)


RL301在37℃加压21天后,性能未发生显著变化。此外,RL301可耐受55℃ 2 h,更加适配于对温度要求较高的反应,如:RT-qPCR、RT-LAMP等。


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